改良Coombs试验
改良Coombs试验（Modified Coombs Test），又称间接抗人球蛋白试验（Indirect Antiglobulin Test, IAT），是免疫血液学中用于检测血清中不完全抗体的重要方法，广泛应用于输血前交叉配血、新生儿溶血病筛查及自身免疫性溶血性贫血的诊断。
一、试验原理
人体产生的某些IgG类抗体（如抗-D、抗-K等）能与红细胞表面抗原结合，但不足以引起红细胞凝集。改良Coombs试验通过加入抗人球蛋白试剂（含抗-IgG和/或抗补体成分），桥接已致敏的红细胞，从而引发可见的凝集反应。
二、操作步骤
- 样本准备：采集患者血清或血浆；准备已知抗原阳性的试剂红细胞（如O型Rh阳性红细胞）。
- 致敏阶段：将患者血清与试剂红细胞在37℃孵育30–60分钟，使不完全抗体结合到红细胞表面。
- 洗涤：用生理盐水充分洗涤红细胞3–4次，去除未结合的抗体和蛋白质。
- 加抗人球蛋白试剂：加入适量抗人球蛋白试剂，轻柔混匀。
- 离心观察：低速离心后肉眼或显微镜下观察是否出现凝集。
三、结果判读
- 阳性：出现明显凝集，提示血清中存在针对红细胞抗原的不完全抗体。
- 阴性：无凝集，表示未检测到相关抗体（需排除操作失误或抗体浓度过低）。
四、临床意义
改良Coombs试验阳性常见于以下情况：
- 输血前发现意外抗体，避免溶血性输血反应；
- 孕妇产前筛查，预防新生儿溶血病（HDN）；
- 诊断自身免疫性溶血性贫血（AIHA）；
- 评估药物诱导的免疫性溶血。
五、注意事项
- 洗涤步骤必须彻底，否则残留血清会中和抗人球蛋白试剂，导致假阴性；
- 抗人球蛋白试剂需定期效价验证；
- 部分弱抗体可能需要延长孵育时间或使用增强介质（如LISS、PEG）提高敏感性。