什么是ProteinA蛋白?
ProteinA(蛋白A)是一种由金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)分泌的表面蛋白,因其能特异性地与多种哺乳动物的免疫球蛋白(尤其是IgG)的Fc段高亲和力结合而被广泛研究和应用。
自20世纪60年代被发现以来,ProteinA已成为抗体纯化、免疫检测及生物制药领域的关键工具蛋白。
结构特征
ProteinA蛋白由以下主要结构域组成:
- 信号肽:引导蛋白分泌至细胞外。
- 五重IgG结合结构域(E、D、A、B、C):每个约含58个氨基酸,可独立结合IgG的Fc区域。
- 细胞壁锚定区:帮助蛋白固定在细菌细胞壁上。
现代重组ProteinA通常只保留多个重复的IgG结合结构域,以提高稳定性和结合效率。
核心功能
- 高亲和力结合人、兔、猪、狗等多种物种的IgG抗体。
- 干扰免疫系统识别,帮助细菌逃避免疫清除(天然功能)。
- 作为亲和层析配体,用于单克隆抗体(mAb)的大规模纯化。
主要应用领域
- 抗体纯化:ProteinA亲和层析是生物制药中单抗生产的“金标准”步骤。
- 免疫沉淀(IP)与Co-IP:用于捕获目标抗原-抗体复合物。
- ELISA与Western Blot:作为二抗替代物增强检测信号。
- 诊断试剂开发:用于快速检测血清中的特异性抗体。
研究与发展趋势
近年来,科学家通过蛋白质工程对ProteinA进行改造,例如:
- 提高其在低pH洗脱条件下的稳定性;
- 降低非特异性结合;
- 开发耐碱性突变体,延长层析柱使用寿命。
💡 小知识:目前全球超过90%的治疗性单克隆抗体生产都依赖ProteinA亲和层析技术。