什么是Coombs试验?
Coombs试验,又称抗人球蛋白试验(Antiglobulin Test),是用于检测红细胞表面或血清中不完全抗体的重要免疫学实验。广泛应用于新生儿溶血病、自身免疫性溶血性贫血、输血反应等疾病的诊断。
直接Coombs试验(Direct Coombs Test)
用于检测患者红细胞表面是否已结合不完全抗体或补体。
操作步骤:
- 采集患者抗凝全血,用生理盐水洗涤红细胞3~4次,去除血浆中游离抗体。
- 取洗净的红细胞配制成2%~5%悬液。
- 加入抗人球蛋白试剂(如抗IgG、抗C3d等)1~2滴。
- 轻轻混匀,室温静置15~30分钟。
- 观察是否出现凝集:出现凝集为阳性,表示红细胞表面有抗体或补体附着。
间接Coombs试验(Indirect Coombs Test)
用于检测患者血清中是否存在游离的不完全抗体。
操作步骤:
- 取患者血清与已知抗原阳性的红细胞(如O型Rh阳性红细胞)混合。
- 37℃孵育30~60分钟,使抗体与红细胞结合。
- 用生理盐水洗涤红细胞3~4次,去除未结合的抗体。
- 加入抗人球蛋白试剂,混匀后室温静置15~30分钟。
- 观察凝集反应:出现凝集为阳性,说明血清中存在相应不完全抗体。
临床意义
- 直接法阳性:见于自身免疫性溶血性贫血、新生儿溶血病、药物诱导溶血等。
- 间接法阳性:提示血清中存在同种抗体,常用于产前检查、交叉配血等。
注意事项
- 洗涤红细胞必须彻底,避免残留血浆干扰结果。
- 抗人球蛋白试剂需新鲜、未失效。
- 阴性对照和阳性对照应同时进行,确保实验可靠性。
- 部分弱阳性反应需借助显微镜或离心增强判断。