什么是Coombs试验?
Coombs试验,又称抗人球蛋白试验(Antiglobulin Test),用于检测红细胞表面或血清中是否存在不完全抗体。该试验分为直接Coombs试验(检测已致敏红细胞)和间接Coombs试验(检测游离抗体)。
直接Coombs试验步骤
- 采集患者抗凝全血,用生理盐水洗涤红细胞3~4次,去除血浆蛋白。
- 取最后一遍压积红细胞,配制成2%~5%的红细胞悬液。
- 向试管中加入1滴红细胞悬液和2滴抗人球蛋白试剂(Coombs血清)。
- 充分混匀后,以1000 rpm离心1分钟。
- 轻轻摇动试管,观察是否出现凝集反应。
- 若出现凝集,结果为阳性;无凝集则为阴性。
临床意义:阳性提示体内存在自身免疫性溶血性贫血、新生儿溶血病、药物诱导溶血等。
间接Coombs试验步骤
- 准备患者血清(含可能存在的不完全抗体)。
- 加入已知抗原阳性的标准红细胞(如Rh阳性O型红细胞)。
- 37℃孵育30~60分钟,使抗体与红细胞结合。
- 用生理盐水洗涤红细胞3~4次,去除未结合的抗体。
- 加入抗人球蛋白试剂,混匀后离心。
- 观察是否出现凝集。
临床意义:常用于产前检查(筛查母体抗胎儿红细胞抗体)、交叉配血、输血前抗体筛查等。
注意事项
- 洗涤红细胞必须彻底,否则残留血浆中的免疫球蛋白可能导致假阳性。
- 抗人球蛋白试剂需在有效期内,并避免反复冻融。
- 离心速度和时间应严格控制,避免假阴性。
- 部分药物(如青霉素、头孢类)可能干扰试验结果。